10× Tampone di trasferimento tris-glicina

Questo prodotto è un concentrato 10-volte costituito da 200 mM di Tris e 1,92 M di glicina, senza metanolo o etanolo anidro. Prima dell'uso, prendere 100 ml di questo prodotto, quindi aggiungere 600 ml di acqua deionizzata o distillata per mescolare, quindi continuare ad aggiungere 200 ml di etanolo anidro per mescolare e infine riempire l'acqua deionizzata o distillata per fissare il volume a 1 L. Dopo la miscelazione, si otterrà 1x soluzione di lavoro di trasferimento Tris-Glycine di 20 mM Tris, 192 mM glicina, 20% di etanolo anidro, pH 8,2-8,6 a 25 gradi. Il tampone di trasferimento Tris-Glycine 10× è adatto per il trasferimento a umido o semisecco di esperimenti Western Blot.

Spedire e conservare a temperatura ambiente, valido per 12 mesi.

1. Per le proteine ​​convenzionali con peso molecolare da piccolo a medio (25-70 kDa), le condizioni consigliate per il trasferimento sono 300 mA per circa 30 minuti.

2. Per le proteine ​​convenzionali ad alto peso molecolare, il tempo di trasferimento può essere esteso in modo appropriato, con un tempo di trasferimento consigliato di 300 mA per 45-60 min.

3. Per proteine ​​di piccolo peso molecolare inferiore a 20 kDa, si consiglia di utilizzare una membrana in PVDF con dimensioni dei pori più piccole di 0,22 μm con 200 mA per 20-25 min o 300 mA per 15-20 min . Anche il contenuto di metanolo (che può essere sostituito da etanolo) può essere aumentato al 25% per migliorare la fissazione di piccole proteine ​​molecolari nel gel.

4. Per le proteine ​​con peso molecolare particolarmente elevato, si consiglia di estendere il tempo di trasferimento a 300 mA per 60-90 min o più, aggiungere una quantità adeguata di SDS alla soluzione di trasferimento nel finale concentrazione di circa 0,5‰ per favorire il rilascio delle proteine ​​dal gel. Allo stesso tempo, a causa del lungo tempo di trasferimento, è necessario prestare attenzione all'effetto del modulo di raffreddamento, se necessario è possibile sostituire un nuovo modulo di raffreddamento a metà.

1. Si prega di utilizzare la soluzione di lavoro il prima possibile dopo la preparazione. Si consiglia di diluire i reagenti con acqua purificata per uso di laboratorio (G4701-500ML).

2. Questo prodotto può presentare precipitazione di cristalli in caso di bassa temperatura ambiente, questo è un fenomeno normale, è possibile moderare il riscaldamento, agitare magneticamente per favorire la dissoluzione, per scioglierlo completamente prima della diluizione e dell'uso.

3. Il colore normale di questo prodotto è incolore e trasparente, se appare marrone chiaro o marrone giallastro, deve essere eliminato immediatamente.

4. Per la vostra sicurezza e salute, indossate occhiali, guanti o indumenti protettivi.

Solo per uso di ricerca!

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