Colorante per acido nucleico GoldView (10000×, solubile in acqua)

This product is a cellular permeable nucleic acid binding dye that can replace ethidium bromide (EtBr, EB). When performing agarose gel electrophoresis, it emits strong green fluorescence after binding with double-stranded DNA and red fluorescence after binding with single-stranded DNA or RNA. The sensitivity is equivalent to EB and the method of use is exactly the same. Goldview is particularly suitable for the detection of large fragments (>1kb) di DNA, con sensibilità ridotta a meno di 500bp.

Spedire e conservare a temperatura ambiente; validità 24 mesi.

1. Metodo di tintura in gel

UN. Per preparare il gel, aggiungere 5-10 μL di GoldView Nucleic Acid Dye (10,000 x, solubile in acqua) per 50 mL di gel di agarosio (consigliato GC205013) quando si raffredda fino a quando non è caldo e mescolare accuratamente, quindi versato e attendere che il gel di agarosio si solidifichi completamente per l'elettroforesi del campione.

B. Dopo l'elettroforesi, le osservazioni sono state effettuate utilizzando un sistema di imaging su gel o un trasmissometro a luce visibile.

2. Metodo di tintura per immersione

UN. Elettroforesi secondo metodi convenzionali.

B. Diluire il colorante per acido nucleico GoldView (10000×, solubile in acqua) a 1× (ad esempio, aggiungere 5 μL di soluzione madre GoldView Nucleic Acid Dye 10000× a 50 ml di tampone per elettroforesi 1×).

C. Posizionare con attenzione il gel in un contenitore adatto e immergere il gel con una quantità sufficiente di soluzione colorante 1x, quindi incubarlo per 10 minuti - 30 minuti in uno shaker a temperatura ambiente lontano dalla luce. (il tempo specifico dipende dallo spessore del gel e dalla quantità di acido nucleico) Se si tratta di gel di acrilammide, incubato da 30 minuti a 1 ora e prolungato con l'aumento del contenuto di acrilammide.

D. Dopo la tintura, se necessario, il gel può essere agitato in acqua per 30 minuti per eliminare il colore.

e. Le osservazioni vengono effettuate utilizzando sistemi di imaging su gel o trasmissometri a luce visibile.

1. Non è necessario refrigerare il colorante a bassa temperatura. Si prega di conservarlo a temperatura ambiente lontano dalla luce.

2. Centrifugare immediatamente il prodotto sul fondo della provetta prima dell'uso, quindi condurre gli esperimenti successivi.

3. Il componente principale di Goldview è l'arancio di acridina, che ha permeabilità cellulare e presenta una certa citotossicità.

4. I gel contenenti coloranti dell'acido nucleico Goldview non sono adatti per esperimenti di recupero del gel.

5. Il metodo di tintura in gel riduce la mobilità degli acidi nucleici.

6. Lo spessore del gel non deve superare 0,5 cm, un gel troppo spesso influenzerà la sensibilità del rilevamento.

7. Non sciogliere ripetutamente gli agarosio che già contengono Goldview, poiché ciò ridurrà la sensibilità del rilevamento dell'acido nucleico.

8. La soluzione colorante può essere riutilizzata per circa 3 volte e si consiglia di conservare la soluzione colorante usata che deve essere utilizzata continuamente al riparo dalla luce.

9. Si raccomanda agli operatori di utilizzarlo in aree specifiche, di adottare misure protettive, di indossare guanti e maschere e di smaltire correttamente i rifiuti.

Solo per uso di ricerca!

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