0,25% di trypsin (solubile in PBS, rosso fenolo, senza EDTA)

La tripsina è una serina idrolasi che taglia le estremità carbossiliche dei residui di lisina e arginina nelle catene polipeptidiche. La digestione della tripsina viene utilizzata nell'estrazione, nella coltura e nella coltura cellulare in vitro delle cellule tissutali per idrolizzare le proteine ​​intercellulari e per dissociare tessuti o cellule in singole cellule. La tripsina viene digerita più efficacemente a 37 gradi, pH 8.0. La concentrazione operativa comune di trypsin è 0,25%.

Questo prodotto contiene {{0}},25% di trypsin con indicatore rosso fenolo, senza EDTA, il solvente è un tampone PBS, sterilizzato mediante filtrazione da 0,1 μm.

Spedire con ghiaccio bagnato; Negozio a -20 grado, valido per 12 mesi. Evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti.

Cellule aderenti

1. Aspirare il terreno di coltura cellulare e lavare le cellule con PBS sterile, soluzione di D-Hank o terreno di coltura privo di siero per rimuovere il siero rimanente.

2. Aggiungere una quantità adeguata di questo prodotto per coprire le cellule e lasciarlo riposare per la digestione per 1-5 min a temperatura ambiente.

3. Al microscopio, quando le cellule appaiono in evidente contrazione, è più facile soffiarle via con la pipetta. Aspirare la soluzione di digestione cellulare della trypsin, aggiungere il terreno di coltura cellulare contenente siero e soffiare delicatamente le cellule per ottenere la sospensione cellulare, che può essere direttamente sottocoltivata. Se è difficile rimuovere le cellule dal fondo della piastra quando si soffia delicatamente con una pipetta, indicando un tempo di digestione insufficiente, digerire nuovamente con l'aggiunta di soluzione di digestione cellulare con trypsin. Non digerire eccessivamente.

1. A causa delle diverse proprietà dei tessuti o delle cellule, lo sperimentatore dovrebbe determinare il tempo di digestione ottimale in base alla situazione specifica; Il tempo di digestione non dovrebbe essere troppo lungo, altrimenti l'adesione e la crescita cellulare ne risentiranno.

2. Questo prodotto non contiene agenti batteriostatici. Particolare attenzione dovrebbe essere prestata al funzionamento asettico durante l'uso per evitare la contaminazione dei succhi digestivi da parte di microrganismi.

3. Questo prodotto non deve essere conservato a 4 gradi per un lungo periodo per evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti. Si consiglia di dividerlo in piccole porzioni e di conservarlo a -20 gradi.

4. Per la selezione di EDTA e rosso fenolo nella trypsin, la soluzione di digestione della trypsin contenente EDTA può essere selezionata per cellule tumorali generali in base alle esigenze sperimentali. Per le cellule più sensibili e vulnerabili, come le cellule primarie e le cellule facilmente digeribili, scegli una soluzione di digestione con trypsin senza EDTA. Se le cellule sono particolarmente sensibili, scegliere una soluzione di digestione della trypsin con una concentrazione di trypsin inferiore. Per il rilevamento dell'apoptosi mediante citometria a flusso, è necessario utilizzare una soluzione di digestione con trypsin senza EDTA.

5. Questo prodotto contiene un sistema fosfato, la soluzione è gialla dopo la crioconservazione a bassa temperatura. Ciò è dovuto alla temperatura causata dal valore del pH della soluzione che cambia, nel normale scongelamento e riscaldamento che tornerà al colore rosso, non influisce sulle prestazioni del prodotto. È possibile che per qualche motivo (ad esempio, spedizione su ghiaccio secco) il pH della soluzione possa abbassarsi leggermente, cambiando così il colore della soluzione da rosso a giallo chiaro. Questa soluzione giallo chiaro può ancora essere utilizzata oppure può essere utilizzata anche dopo aver regolato con precisione il pH con una soluzione sterile di NaOH 2 M.

6. Per la vostra sicurezza e salute, indossate occhiali, guanti o indumenti protettivi.

Solo per uso di ricerca!

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