0,25% di trypsin (solubile in D-Hank, senza EDTA, senza rosso fenolo)

La tripsina, abbreviata in trypsin, è una serina idrolasi che taglia i terminali carbossilici dei residui di lisina e arginina nelle catene polipeptidiche. Nel processo di estrazione, coltura e coltura cellulare in vitro delle cellule tissutali, la soluzione di digestione della tripsina viene utilizzata per idrolizzare le proteine ​​intercellulari, in modo che il tessuto o la cellula possano essere dispersi in una singola cellula. La capacità di digestione della trypsin era più forte a 37 gradi pH 8.0. La concentrazione operativa comune di trypsin è 0,25%. L'EDTA può chelare gli ioni di calcio e magnesio. L'uso di EDTA nella soluzione di trypsin può accelerare l'idrolisi delle proteine ​​della giunzione intercellulare e migliorare la digestione. Il rosso fenolo è un indicatore di pH. La soluzione è rosso violaceo quando è più basica, rosso-arancio quando è più acida e rosa quando è quasi neutra.

Questo prodotto è una soluzione di digestione di trypsin al {{0}}, 25%, contenente 0, 25% di trypsin, disciolta nel tampone di Hank, senza EDTA, senza indicatore rosso fenolo, sterilizzata mediante filtrazione da 0,1 μm .

Trasporto con ghiaccio secco; Negozio a -20 grado, valido per 12 mesi. Evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti.,

Cellule aderenti

1. Asciugare il terreno di coltura cellulare e lavare le cellule con PBS sterile, soluzione di Hanks o terreno di coltura privo di siero per rimuovere il siero rimanente.

2. Aggiungere una quantità adeguata di questo prodotto per coprire le cellule e lasciarlo riposare per la digestione per 1-5 min a temperatura ambiente.

3. Al microscopio, quando le cellule appaiono in evidente contrazione, è più facile soffiarle delicatamente con una pistola a pipetta. Quindi la soluzione di digestione cellulare con trypsina viene rimossa mediante aspirazione e viene aggiunto il terreno di coltura cellulare contenente siero per abbattere delicatamente le cellule per produrre la sospensione cellulare, che può essere direttamente sottocoltivata. Se è difficile rimuovere le cellule dal fondo della piastra quando si soffia delicatamente con una pistola pipetta, indicando un tempo di digestione insufficiente, digerire nuovamente con l'aggiunta di soluzione di digestione cellulare con trypsin. Non digerire eccessivamente.

1. A causa delle diverse proprietà dei tessuti o delle cellule, lo sperimentatore dovrebbe determinare il miglior tempo di digestione in base alla situazione specifica; Il tempo di digestione delle cellule non dovrebbe essere troppo lungo, altrimenti l'adesione e la crescita cellulare ne risentiranno.

2. Questo prodotto non contiene agenti batteriostatici. Particolare attenzione dovrebbe essere prestata al funzionamento asettico durante l'uso per evitare la contaminazione dei succhi digestivi da parte di microrganismi.

3. Questo prodotto non deve essere conservato a 4 gradi per un lungo periodo per evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti. Si consiglia di dividerlo in piccole parti e di conservarlo a -20 gradi.

4. Per la selezione di EDTA e rosso fenolo negli enzimi pancreatici, la soluzione di digestione della tripsina contenente EDTA può essere selezionata per cellule tumorali generali in base alle esigenze sperimentali. Per le cellule più sensibili e vulnerabili, come le cellule primarie e le cellule facilmente digeribili, scegli una soluzione di digestione con trypsin senza EDTA. Se le cellule sono particolarmente sensibili, scegliere una soluzione di digestione della trypsin con una concentrazione di trypsin inferiore. Se è necessario rilevare l'apoptosi mediante citometria a flusso, è necessario utilizzare una soluzione di digestione con trypsin senza EDTA.

5. Per la vostra sicurezza e salute, indossate un camice da laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.

Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca scientifica, non per diagnosi cliniche!

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